主要儀器與試劑

 

　　液相色譜儀、配四元梯度泵、在線真空脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器、固相萃取儀、超聲波清洗器、離心機(jī)、固相萃取小柱：OASIS MCX，6mL，500mg。三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，純度99%。

 

　　樣品處理

 

　　提取：準(zhǔn)確稱取經(jīng)粉碎混勻后樣品5.0g，加入50mL 1%三氯乙酸溶液及2 mL 2%乙酸鉛溶液，混勻后超聲提取30min，高速離心后取上清液待凈化。

 

　　凈化：將固相萃取小柱（6mL，500mg）置于固相萃取儀樣品架上，分別加入5mL甲醇、5mL水活化，再準(zhǔn)確移取5.0mL離心液上柱。活化及上 樣時(shí)，將樣品架升至頂部通過(guò)調(diào)節(jié)面板旋鈕來(lái)調(diào)節(jié)N2氣流小，控制流速不超過(guò)1mL/min。然后再用5mL水、5mL甲醇洗滌SPE   柱，棄去洗脫液，將小柱升至頂部調(diào)節(jié)氣閥旋鈕自動(dòng)加壓吹干小柱，用5%氨水甲醇溶液5mL洗脫，收集洗脫液用氮吹儀吹干，用甲醇-水（2:8,V/V）定 容至1.0mL,過(guò)0.45μm濾膜，上機(jī)測(cè)定。

 

　　樣品提取與凈化

 

　　三氯乙酸具有沉淀乳及其制品中蛋白質(zhì)的作用，而且有助于三聚氰胺的溶解。由于三聚氰胺呈弱堿性。（弱陽(yáng)離子化合物），采用陽(yáng)離子交換柱進(jìn)行凈化可達(dá)到去除雜質(zhì)，提高檢測(cè)靈敏度、重現(xiàn)性和回收率的效果。

 

　　固相萃取儀的應(yīng)用

 

　　固相萃取儀具有、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)。它可通過(guò)該裝置中的氣流調(diào)節(jié)閥來(lái)控制小柱流速的大小，并可直接吹干小柱，保證每小柱在活化洗脫過(guò)程中具有良好的重現(xiàn) 性。并且可配套不同規(guī)格的固相萃取小柱（如1mL，3mL，6mL等）使用，一次操作可同時(shí)處理48個(gè)樣品。我們?cè)谀谭壑刑砑樱?.0～50.0）   ug/mL等不同濃度的三聚氰胺，進(jìn)行加標(biāo)回收和重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)，回收率在95～99%之間。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于3%。

 

　　結(jié)論

 

　　固相萃取儀的加壓操作是通過(guò)在固相萃取小柱的上方施加一定壓力空氣或N2來(lái)實(shí)現(xiàn)。

 

　　這樣可加快過(guò)濾速度，控制柱子活化、淋洗、洗脫全過(guò)程的流速，使溶液易于進(jìn)入固定相孔隙，有利于樣液與固定相緊密接觸，從而提高萃取效果。它克服常規(guī) 的手動(dòng)固相萃取操作費(fèi)時(shí)、不能確保穩(wěn)定的流速、不同人員操作結(jié)果偏差較大的問(wèn)題，通過(guò)簡(jiǎn)單的控制消除人為操作的誤差，保證在短時(shí)間內(nèi)同時(shí)處理幾十個(gè)樣品并具有良好的重現(xiàn)性。